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细胞培养知识|细胞换液几种方式
培养细胞的过程中,换液是一项常规的操作,通过换液清除掉细胞在生长过程中产生的代谢废物,补充新鲜的含血清培养基,使细胞能够正常生长。换液前工作准备环境准备:相对密封、防尘、防菌的无菌室操作者准备:双手清洁呈可操作状态物品准备:超净工作台、CO2培养箱、装有75%医用消毒酒精的酒精喷壶、PBS缓冲液、含血清培养基、巴氏吸管、移液器、废液缸。工作准备:预热完全培养基,酒精棉擦拭培养基瓶外表面后移入生物安全柜或超净工作台。细胞培养箱中取出的细胞,酒精棉擦拭培养瓶或
2023.09.04
细胞培养知识|悬浮细胞
实验室里培养的细胞一般可以简单地分为两大类,贴壁细胞和悬浮细胞。贴壁细胞(adherent cells)指的是这类生长必须有可以贴附的支持物表面,只有依靠自身分泌的或培养基中提供的贴附因子才能在该表面上生长、繁殖的细胞。当细胞在该表面生长后,一般会形成两种形态,即成纤维样细胞或者上皮样细胞。而另一类则是细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,这类细胞我们称之为悬浮细胞。悬浮细胞在显微镜下观察,一般是单个生长的大小均一的圆圆的、亮亮的形态规则的细
2023.08.01
TLC薄层点板常见问题与解决办法
1、点样是成功分离的关键,怎样提高点样效率?(1)点样圆点小而圆,直径尽量不要超过2mm;(2)在便于显色的前提下,点样量尽量少,同时就要注意点样液体的浓度,防止过载拖尾;(3)点样勿上薄层表面;(4)点样圆点尽量远离薄层边缘,至少相隔3mm,减少边缘效应;(5)所有点样点尽量保持在一条与底边平行的直线上,务必点交叉点;(6)点样完成后,溶剂用吹风机尽量吹干。2、两个点离的太近怎么办?(1)在展开剂中多次展多次;(2)增加展开剂的极性;(3)选择不同体系的
2023.08.01
藻类培养基——植物组织培养
藻类培养基可由浓缩溶液或粉末盐混合物制备而成。浓缩溶液组分较完整,包含维生素,应冷冻保存。而粉末培养基则可以灵活地自定义培养基的最终组分。这类用于制备水生物种生长培养基的粉末由“富集”盐混合物和完全合成培养基的盐混合物组成。将粉末或浓缩溶液分别加入淡水或海水中以制备富含淡水或海水的培养基。为了制备合成海生生长培养基,将粉末添加到组织培养级淡水中。已公布的水生物种生长培养基配方通常含有碳酸氢钠。我们的粉末混合物中不包含碳酸氢钠,应视需要添加在培养基中。从包装
2023.07.21
细胞生长缓慢的原因解析
一、培养体系问题1、检查细胞是否存在污染。(1)如果培养细胞时未添加抗生素,细胞污染则是不可避免的。①用肉眼和显微镜进行检查。②如果细胞被污染则要弃掉。(2)支原体污染不易察觉,因此需要进行定期检测。(3)检查可能造成污染的途径和原因。2、检查用于培养细胞的培养基和血清(例如批次厂商是否相同)。3、如果排除问题与培养基无关,那么可能还是细胞存在问题。(1)复苏另一支冻存的细胞,与正在培养的细胞进行比较。但是需要注意的是两种细胞的培养应分开,以免在培养之初就
2023.07.11
产品说明书|固相萃取固定化亲和色谱微球
英文名称:SPE-Ti-IMAC, 100%中文名称:固相萃取固定化亲和色谱微球保存条件:室温储存,保质期为五年。适用范围:本产品适用于对磷酸肽的鉴定和富集。自备材料:•样品:蛋白酶解液注意:蛋白酶解液中不能含有干扰磷酸肽富集的物质,如 EDTA等络合剂、含磷酸根的缓冲盐!•Loading buffer:80%ACN / 6%TFA水溶液作用:将酶解液酸化,高浓度的 TFA-可以抑制酸性肽段的残留•Wash buffer
2022.12.07
常用病毒灭活剂β-丙内酯(BPL)与甲醛对比
灭活是指破坏病原体的生物学特性,但尽可能避免影响其免疫原性或破坏血清中补体活性的过程。常用的病毒灭活剂有β-丙内酯(BPL)和甲醛。β-丙内酯(BPL)为四元环内酯类有机化合物,无色液体,略带甜味。BPL具有高反应性,易水解,可与羟基,氨基,羧基,巯基和酚基反应。BPL曾被用作组织移植物和血浆的消毒剂、塑料聚合行业的单体、及丙酸酯化合物合成的中间体。由于存在致癌性,BPL在这些行业的使用已减少,但仍被广泛应用于各种疫苗灭活。BPL与传统灭活剂甲醛的比较对比
2022.10.21
寡核苷酸LC分析缓冲液和添加剂选择
寡核苷酸(Oligonucleotide),是一类只有20个以下碱基对的短链核苷酸的总称(包括脱氧核糖核酸DNA或核糖核酸RNA内的核苷酸),寡核苷酸可以很容易地和它们的互补对链接,所以常用来作为探针确定DNA或RNA的结构,经常用于基因芯片、电泳、荧光原位杂交等过程中。LC-MS是众多寡核苷酸生物分析方法中的一种。由于寡核苷酸属于酸性强极性化合物,因此在一般色谱柱上很难保留。离子对反相色谱法是较为常用的一种方法,离子对试剂可以增强寡核苷酸在反相色谱上的保
2022.09.15
活体成像试剂之荧光素
生物化学发光检测是活体成像技术之一。生物化学发光法是基于荧光素酶能催化底物化学发光的原理,将体外能稳定表达荧光素酶的细胞株植入动物体内,与后期注射入体内的底物发生反应产生ATP,生成激发态的氧化荧光素,当回复至基态时多余的能量以光子形式释放,再利用光学系统检测光强度,间接反映出细胞数量的变化或细胞的定位。该技术已被广泛应用于多个领域,例如肿瘤或疾病动物模型的建立,还可用于病毒学研究、siRNA研究、干细胞研究、蛋白质相互作用研究等。常见的荧光素酶有两种,分
2022.09.15
实验室玻璃和塑料器具的清洗方法
为防止实验室玻璃和塑料器具粘上化学物质导致粘附残留物从而导致器具损坏,在使用后应立即清洗。下面小编就简单说说有哪些清洗方法。1、擦拭和刷洗一般来说擦拭和刷洗方法是使用一块在清洗剂中充分浸泡的布或者海绵继进行清洗的方法。注意:实验器具一定不能使用具有研磨效果的洗涤剂进行清洗,以免损伤器具表面。2、浸泡该方法是将实验器具在室温下泡入洗涤剂约20~30分钟,然后使用流动水冲洗,最后再使用蒸馏水清洗。如有顽固残留物,可升高浸泡温度与延长浸泡时间。有条件的实验室,可
2022.08.29

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