培养细胞的过程中，换液是一项常规的操作，通过换液清除掉细胞在生长过程中产生的代谢废物，补充新鲜的含血清培养基，使细胞能够正常生长。换液前工作准备环境准备：相对密封、防尘、防菌的无菌室操作者准备：双手清洁呈可操作状态物品准备：超净工作台、CO2培养箱、装有75%医用消毒酒精的酒精喷壶、PBS缓冲液、含血清培养基、巴氏吸管、移液器、废液缸。工作准备：预热完全培养基，酒精棉擦拭培养基瓶外表面后移入生物安

实验室里培养的细胞一般可以简单地分为两大类，贴壁细胞和悬浮细胞。贴壁细胞(adherent cells)指的是这类生长必须有可以贴附的支持物表面，只有依靠自身分泌的或培养基中提供的贴附因子才能在该表面上生长、繁殖的细胞。当细胞在该表面生长后，一般会形成两种形态，即成纤维样细胞或者上皮样细胞。而另一类则是细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，这类细胞我们称之为悬浮细胞。悬浮细胞在显微镜

1、点样是成功分离的关键，怎样提高点样效率？(1)点样圆点小而圆，直径尽量不要超过2mm；(2)在便于显色的前提下，点样量尽量少，同时就要注意点样液体的浓度，防止过载拖尾；(3)点样勿上薄层表面；(4)点样圆点尽量远离薄层边缘，至少相隔3mm，减少边缘效应；(5)所有点样点尽量保持在一条与底边平行的直线上，务必点交叉点；(6)点样完成后，溶剂用吹风机尽量吹干。2、两个点离的太近怎么办？(1)在展开

藻类培养基可由浓缩溶液或粉末盐混合物制备而成。浓缩溶液组分较完整，包含维生素，应冷冻保存。而粉末培养基则可以灵活地自定义培养基的最终组分。这类用于制备水生物种生长培养基的粉末由“富集”盐混合物和完全合成培养基的盐混合物组成。将粉末或浓缩溶液分别加入淡水或海水中以制备富含淡水或海水的培养基。为了制备合成海生生长培养基，将粉末添加到组织培养级淡水中。已公布的水生物种生长培养基配方通常含有碳酸氢钠。我们

一、培养体系问题1、检查细胞是否存在污染。(1)如果培养细胞时未添加抗生素，细胞污染则是不可避免的。①用肉眼和显微镜进行检查。②如果细胞被污染则要弃掉。(2)支原体污染不易察觉，因此需要进行定期检测。(3)检查可能造成污染的途径和原因。2、检查用于培养细胞的培养基和血清(例如批次厂商是否相同)。3、如果排除问题与培养基无关，那么可能还是细胞存在问题。(1)复苏另一支冻存的细胞，与正在培养的细胞进行